强悍：不受突变株影响的新冠N抗体配对 ——你且千变万化，我有火眼金睛

强悍：不受突变株影响的新冠N抗体配对

——你且千变万化，我有火眼金睛

众所周知，SARS-CoV-2是一种RNA病毒，其基因组在复制过程中缺少纠错机制，因而比较容易产生突变。随着疫情的进展，全球已累计感染了超过1.6亿人，据估计实际感染人数应该远高于此。一个较高的突变率乘以巨大的感染人数，这显然提高了突变的概率。到目前为止，已鉴定出VOC（Variant of concern: variants for which there is evidence of an increase in transmissibility, more severe disease and or escape of neutralization by antibodies）突变5株，VOI（Variant of Interest: variants with specific genetic markers that have been associated with changes that may impact public health.）突变11株。其中，有我们既有我们耳熟能详的英国（B.1.1.7）、南非（B.1.351）、巴西（P.1）突变株，更有最近令人闻风丧胆的印度突变株（B.1.617）。

由于N蛋白在病毒内含量较高，因此各家的抗原检测试剂均是以N蛋白为标志物进行开发的。与2019年底开始流行的野生型相比，上述突变株的S-RBD都发生了较大的变化（见下表，数据来源https://viralzone.expasy.org/9556）。除此以外，其N，M，E和orfab1等基因也发生了诸多变化。以目前流行趋势最猛的印度突变株（B.1.617）为例，除了在RBD上出现了L452R和E484Q双突变外，其N基因也带有D377Y和R203M双突变。这些突变株的出现，显然会引起新冠抗原检测试剂厂家的担忧——这些突变点会不会正好落在自己的抗体配对内？这些突变究竟会对自己试剂的灵敏度产生什么样的影响？自己公司的试剂是不是可以检测出突变型病毒？

   百新意近期推出的N配对抗体BN07及其改进型BN12（BN12是BN07的突变体，表位一致）/BN08表现惊艳，已被国内十几家大中型IVD公司选为生产原料（具体内容参见《后浪来了——新冠N抗原检测配对抗体“火眼”（BN07）和“金睛”（BN08）问世》、《百新意新冠N抗原检测配对抗体测评结果》）。在前期筛选过程中，我们已经验证了BN08的表位位于1-40位氨基酸之间，而BN07/BN12的表位则位于30-120位之间（ELISA图）。可见，上述突变列表中，仅有英国株B.1.1.7的D3L和巴西株P.1的P80R两个突变点在BN07与BN08的范围内。因此我们推测，BN07/BN12与BN08的配对，不会受到目前已知的大部分VOC和VOI突变株的影响。至于D3L和P80R两个突变，根据经验来看这两种氨基酸一般不易出现在抗原抗体结合表位上。

   为了验证我们的推测，百新意研发团队构建了以下突变型N蛋白：包括T205I （对应B.1.351、B.1.427、B.1.429和B.1.214.2）和P80R（对应P.1）单突变，及D3L/S235F（对应B.1.1.7）与D377Y/R203M（对应B.1.617，即印度株）双突变株。如下图可见，由BN07/BN11/BN12与BN08配对组成的金标试纸条对野生型及各种突变型N蛋白的检出限完全一致，因此说明目前已知的突变点对我们的配对均无影响，大家尽可放心使用！

   综上所述，BN07/BN12与BN08组成的配对不仅灵敏度登峰造极，而且还可用来检测目前全部的突变株而不受到其N蛋白突变的影响。这么好的配对，您还不换吗？退一步讲，如果您坚持不换，那至少应该用突变型N蛋白，测测自己的配对受不受影响吧？

咬定青山不放松，立根原在破岩中。

千磨万击还坚劲，任尔东西南北风。